密度梯度离心是分子的分离,其中分离基于分子在离心力下通过密度梯度时的分子密度。
密度梯度离心原理
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密度梯度离心基于以下原理:分子在离心力作用下沉降直至到达密度与它们相同的介质。
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在这种情况下,使用具有密度梯度的介质,该介质必须减小密度或增大密度。
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当样品旋转时,样品中的分子会穿过介质,从而产生离心力。
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当密度更高的分子通过密度梯度时,它们开始向底部移动。
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然后,分子在颗粒密度等于周围介质的点处悬浮。
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以这种方式,具有不同密度的分子在不同的层上分离,然后可以通过各种方法进行回收。
密度梯度离心的步骤
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通过在离心管中轻轻放置较低浓度到较高浓度来创建介质的密度梯度。
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然后将样品放置在梯度上方,并将试管放置在超速离心机中。
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粒子穿过梯度,直到达到其密度与周围介质的密度匹配的点。
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除去和分离级分,获得作为分离单元的颗粒。
密度梯度离心的用途
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密度梯度离心可用于纯化大量生物分子。
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它甚至可以用于纯化不同的病毒,这有助于进一步研究。
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该技术既可以用作分离技术,又可以用于确定各种粒子的密度的技术。
密度梯度离心的例子
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该方法用于著名的实验中,通过使用不同的氮同位素证明DNA是半保守的。
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另一个例子是使用该技术从肌肉匀浆中分离微粒体级分并随后分离具有不同密度的膜囊泡。